| 级别 | 超纯、高纯 |
| 含量 | 95 |
| 品牌 | 泛博 |
| 型号 | CCK |
Cell Counting Kit（CCK试剂盒）
| 目录号 | 产品名称 | 规格 | 包装 |
| 025 | Cell Counting Kit（CCK试剂盒） | 100次 | 1mL |
| 026 | Cell Counting Kit（CCK试剂盒） | 500次 | 5mL |
| 027 | Cell Counting Kit（CCK试剂盒） | 1000次 | 10mL |
| 028 | Cell Counting Kit（CCK试剂盒） | 3000次 | 30mL |
产品简介：Cell Counting Kit简称CCK 试剂盒，为MTT法的替代方法，是一种基于WST（水溶性四唑盐，化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。 CCK法与普通的MTT法相比，具有显著特点：★灵敏度高，数据可靠，重现性好★操作简便，省时省力★水溶性，不需要换液，尤其适合于悬浮细胞★无需放射性同位素和有机溶剂，对细胞毒性低★为1瓶溶液，不需要预制，即开即用★适合于高通量药物筛选 CCK用途：药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验 操作说明：一、制作标准曲线（测定细胞具体数量时）1、先用**计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞。2、按比例（例如：1/2比例）依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每组3-6个复孔。3、接种后培养2-4小时使细胞贴壁，然后加CCK试剂培养一定时间后测定OD值，制作出一条以细胞数量为横坐标（X轴），OD值为纵坐标（Y轴）的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量（试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间。）二、细胞活性检测1、在96孔板中接种细胞悬液（100ul/孔）。将培养板放在培养箱中预培养（在37℃,5% CO2的条件下）。2、向每孔加入10 ul的CCK溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。4、用**测定在450nm处的吸光度。5、如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10 ul 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。三、细胞增值-毒性检测1、在96孔板中配置100ul的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时（在37℃,5% CO2的条件下）。2、向培养板加入10ul不同浓度的待测物质。3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间（例如：6、12、24或48小时）。4、想每孔加入10ul CCK溶液（注意不要再孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）。5、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。6、用**测定在450nm处的吸光度。7、如果暂时不测定OD值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10 ul 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。注意：如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。
备注：
①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间。
②有条件的情况下建议采用多通道移液器，可以减少平行孔减的差异。加入CCK试剂时，建议斜贴着培养板壁加，不要插到培养基页面下加，容易产生气泡，会干扰OD值读数。
③白细胞可能需要培养较长时间。
④当使用标准96孔板时，贴壁细胞的**小接种量至少为1,000 个/孔 (100 μl 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 (100 μl 培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK溶液。
⑤如果没有450nm的滤光片，可以使用吸光度在430-490 nm之间的滤光片，但是450nm滤光片的检测灵敏度**高。⑥培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响。 活力计算：细胞活力*（％）=[A(加药)-A（空白）]/[A（0加药）-A（空白）] ×100
A（加药）：具有细胞、CCK溶液和药物溶液的孔的吸光度
A（空白）：具有培养基和CCK溶液而没有细胞的孔的吸光度
A（0加药）：具有细胞、CCK溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
*细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力 保存条件：4℃避光保存一年有效
