供应 NobleRyder P0030BCA蛋白浓度测定试剂盒 Nob

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BCA蛋白浓度测定试剂盒使用说明

试剂盒组成 包装（500微孔） 保存
 
BCA试剂 100ml 2-8℃
Cu试剂 3ml 2-8℃
PBS稀释液 30ml 2-8℃
BSA蛋白标准 （5mg/ml BSA） 1ml  -20℃
  
 本试剂盒自订购之日起一年内有效。本试剂盒用于酶标板或者200ul比色皿时可做500孔。当使用2ml比色皿时可做50孔，如果是1ml比色皿时可做100孔。

产品简介

碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂（EDTA，EGTA）、还原剂（DTT，巯基乙醇）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。

使用说明

一，微孔**法

1.         配制工作液: 根据标准品和样品数量，按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂（50:1）配制成BCA工作液，充分混匀（混合时可能会有浑浊，但混匀后**会消失）。BCA工作液室温24小时内稳定。

2.         稀释标准品：取10微升BSA标准品用PBS稀释至100微升（样品一般可用PBS稀释），使终浓度为0.5mg/ml。将标准品按0, 2, 4，6，8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白标准品孔中，加PBS补足到20微升。

3.         将样品作适当稀释**多做几个梯度，如作2倍、4倍、8倍稀释），加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

4.         各孔加入200微升BCA工作液，37℃放置15-30分钟。用**测定A562nm，根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时，应注意防止因水分蒸发影响检测结果。

二，分光光度计法、

如没有**，可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。

步骤如下：

1．配制工作液: 根据标准品和样品数量，按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂（50:1）配制成BCA工作液，充分混匀（混合时可能会有浑浊，但混匀后**会消失）。BCA工作液室温24小时内稳定。

2，  稀释标准品：取100微升BSA标准品用PBS稀释至1ml（样品一般可用PBS稀释），使终浓度为0.5mg/ml。

3，  取八支（或者更多）5ml离心管，标让号，按下表加入试剂。

离心管号 1 2 3 4 5 6 7（样品管1） 8（样品管2） 9（样品管3）
标准蛋白BSA 0 40ul 80ul 120ul 160ul 200ul 200ul适当稀释的样品1 200ul适当稀释的样品2 ……
PBS 200ul 160ul 120ul 80ul 40ul 0 0 0 0
BCA工作液 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml 2ml
4，  37℃放置15-30分钟。用分光光度计测562nm处吸光值，根据标准曲线计算出蛋白浓度。

北京诺博莱德科技有限公司位于北京市海淀区，是一家专业从事生化试剂、分子生物学试剂、实验耗材及实验仪器研发、销售、服务为一体的生物科技公司，公司主要经营的进口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, Fermantas（MBI）, NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等；产品涉及化工原料、生化试剂、分子克隆相关试剂、细胞培养及检测常用试剂、实验室常用耗材及仪器。